دوره 35، شماره 8 - ( آبان 1403 )
جلد 35 شماره 8 صفحات 694-679 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Ethics code: IR.IAU.ARAK.REC.1403.165
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Amini K, Azadifar H. THE EFFECT OF LACTOCOCCUS LACTIS (+NIS) PROBIOTIC LYSATE ON THE EXPRESSION OF ANTI-APOPTOTIC BAX AND BCL-2 GENES IN KIDNEY CANCER CELL LINE. Studies in Medical Sciences 2024; 35 (8) :679-694
URL: http://umj.umsu.ac.ir/article-1-6343-fa.html
URL: http://umj.umsu.ac.ir/article-1-6343-fa.html
امینی کیومرث، آزادی فر حامد. تأثیر لیزات پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس (+NIS) بر بیان ژن‌های bax و bcl-2 ضد آپوپتوز رده سلولی سرطان کلیه. مجله مطالعات علوم پزشکی. 1403; 35 (8) :679-694
گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران (نویسنده مسئول) ، DR_Kumarss_Amini@yahoo.com
چکیده: (111 مشاهده)
پیش‌زمینه و هدف: امروزه باکتری‌های لاکتوکوکوس لاکتیس به‌عنوان یک پروبیوتیک در درمان و پیشگیری سرطان نقش کلیدی ایفا می‌کنند. علاوه بر این، سویه‌های لاکتوکوکوس لاکتیس تولیدکننده باکتریوسین‌ها قادر به مهار رشد طیف وسیعی از باکتری‌ها، به‌خصوص سویه‌های مقاوم به آنتی‌بیوتیک، است. هدف از مطالعه حاضر بررسی اثرات لیزات پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس (+ NIS) بر بیان ژن‌های ضد آپوپتوز رده سلولی سرطان کلیه است.
مواد و روش کار: پس از جداسازی و بررسی 60 سویه پروتئوس میرابیلیس توسط تست‌های تشخیصی و بیوشیمیایی، واکنش Multiplex PCR جهت شناسایی ژن‌های ضد آپوپتوز رده سلولی سرطان کلیه انجام شد. پس از کشت و تهیه سوپرناتانت تولیدکننده نایسین، لاکتوکوکوس لاکتی (PTCC1336)، فعالیت آن توسط چاهک گذاری در آگار بررسی گردید. توسط واکنش Real-Time PCR، بیان ژن AcrB در سویه‌های پروتئوس میرابیلیس تیمار شده با سوپرناتانت موردبررسی قرار گرفت.
یافته‌ها: پس از بررسی‌های سمیت سلولی این سوپرناتانت، بیان نسبی ژن‌های bcl-2 و bax در سلول‌های سرطانی کلیه موردمطالعه قرار گرفت. نایسین تهیه‌شده بر روی سویه‌های پروتئوس میرابیلیس به دلیل تحرک و فاکتورهای حدت آن، اثر مهاری اندکی داشت. تجزیه‌وتحلیل سنجش MTT نشان داد که میزان بقای سلولی در سلول‌های سرطانی تیمار شده، با گذر زمان و افزایش غلظت سوپرناتانت بدون سلول لاکتوکوکوس لاکتیس به‌طور قابل‌توجهی کاهش یافته است. از میان 60 نمونه پروتئوس میرابیلیس، 37 نمونه واجد ژن AcrA، 59 نمونه واجد ژن AcrB و 58 نمونه دارای ژن Urea بودند. با توجه به آنالیز داده‌های تست MTT، مقدار غلظت مهارکننده نیمی حداکثر (IC50) برای این سوپرناتانت پس از گذر 72 ساعت μg/ml 8/202 محاسبه شد.
بحث و نتیجه‌گیری: نتایج نشان از کاهش 86/52 درصدی بیان ژن bcl-2 و افزایش 21/60 درصدی بیان ژن bax در سلول‌های سرطانی تیمار شده نسبت به گروه کنترل است. بررسی‌های سمیت سلولی در این تحقیق که با IC50 معادل 8/202 میکروگرم/میلی‌لیتر قادر به سرکوب تکثیر سلول‌های سرطانی کلیه (ACHN) بود. هدف مطالعه بررسی اثرات لیزات پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس (+NIS) بر ژن‌های مرتبط با آپوپتوز در سلول‌های سرطان کلیه بود که این لیزات توانستند بیان ژن bcl-2 را کاهش داده و ژن bax را افزایش دهد، و نشان‌دهنده القای آپوپتوز در سلول‌های سرطانی است.
مواد و روش کار: پس از جداسازی و بررسی 60 سویه پروتئوس میرابیلیس توسط تست‌های تشخیصی و بیوشیمیایی، واکنش Multiplex PCR جهت شناسایی ژن‌های ضد آپوپتوز رده سلولی سرطان کلیه انجام شد. پس از کشت و تهیه سوپرناتانت تولیدکننده نایسین، لاکتوکوکوس لاکتی (PTCC1336)، فعالیت آن توسط چاهک گذاری در آگار بررسی گردید. توسط واکنش Real-Time PCR، بیان ژن AcrB در سویه‌های پروتئوس میرابیلیس تیمار شده با سوپرناتانت موردبررسی قرار گرفت.
یافته‌ها: پس از بررسی‌های سمیت سلولی این سوپرناتانت، بیان نسبی ژن‌های bcl-2 و bax در سلول‌های سرطانی کلیه موردمطالعه قرار گرفت. نایسین تهیه‌شده بر روی سویه‌های پروتئوس میرابیلیس به دلیل تحرک و فاکتورهای حدت آن، اثر مهاری اندکی داشت. تجزیه‌وتحلیل سنجش MTT نشان داد که میزان بقای سلولی در سلول‌های سرطانی تیمار شده، با گذر زمان و افزایش غلظت سوپرناتانت بدون سلول لاکتوکوکوس لاکتیس به‌طور قابل‌توجهی کاهش یافته است. از میان 60 نمونه پروتئوس میرابیلیس، 37 نمونه واجد ژن AcrA، 59 نمونه واجد ژن AcrB و 58 نمونه دارای ژن Urea بودند. با توجه به آنالیز داده‌های تست MTT، مقدار غلظت مهارکننده نیمی حداکثر (IC50) برای این سوپرناتانت پس از گذر 72 ساعت μg/ml 8/202 محاسبه شد.
بحث و نتیجه‌گیری: نتایج نشان از کاهش 86/52 درصدی بیان ژن bcl-2 و افزایش 21/60 درصدی بیان ژن bax در سلول‌های سرطانی تیمار شده نسبت به گروه کنترل است. بررسی‌های سمیت سلولی در این تحقیق که با IC50 معادل 8/202 میکروگرم/میلی‌لیتر قادر به سرکوب تکثیر سلول‌های سرطانی کلیه (ACHN) بود. هدف مطالعه بررسی اثرات لیزات پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس (+NIS) بر ژن‌های مرتبط با آپوپتوز در سلول‌های سرطان کلیه بود که این لیزات توانستند بیان ژن bcl-2 را کاهش داده و ژن bax را افزایش دهد، و نشان‌دهنده القای آپوپتوز در سلول‌های سرطانی است.
نوع مطالعه: پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) |
موضوع مقاله:
میکروبیولوژی
فهرست منابع
1. Frelet-Barrand A. Lactococcus lactis, an attractive cell factory for the expression of functional membrane proteins. Biomol 2022;12(2):180 [DOI:10.3390/biom12020180] [PMID] []
2. Singh VP. Recent approaches in food bio-preservation-a review. Open Vet J 2018;8(1):104-11 [DOI:10.4314/ovj.v8i1.16] [PMID] []
3. Azizpour M, Hosseini SD, Jafari P, Akbary N. Lactococcus lactis: A new strategy for vaccination. Avicenna J Med Biotechnol 2017;9(4):163 [PMID: 29090064] [PMCID: PMC5650732]
4. Van Gijtenbeek LA, Robinson A, Van Oijen AM, Poolman B, Kok J. On the spatial organization of mRNA, plasmids, and ribosomes in a bacterial host overexpressing membrane proteins. PLoS Genet 2016;12(12):e1006523 [DOI:10.1371/journal.pgen.1006523] [PMID] []
5. Karimaei S, Mashhadi R, Mirzaei A, Deyhimfar R, Shabestari AN, Rahimnia R. Antibacterial and antibiofilm activities of nisin from Lactococcus lactis and alteration of the bacteria-induced pro-inflammatory responses on kidney and bladder tumor cell lines. Transl Res Urol 2022;4(1):47-53 [google scholar]
6. Abbdul-Kaliq MT, Rasool KH, Essa RH. Effect of Crude Bacteriocin Isolated from Locally Lactococcus lactis on Cancer Cell Lines. Indian J Forensic Med Toxicol 2020;14(1):281-8 [google scholar]
7. Qian S, Wei Z, Yang W, Huang J, Yang Y, Wang J. The role of BCL-2 family proteins in regulating apoptosis and cancer therapy. Front Oncol 2022;12:985363 [DOI:10.3389/fonc.2022.985363] [PMID] []
8. Park H-A, Broman K, Jonas EA. Oxidative stress battles neuronal Bcl-xL in a fight to the death. Neural Regen Res 2021;16(1):12-5 [DOI:10.4103/1673-5374.286946] [PMID] []
9. Campbell KJ, Tait SW. Targeting BCL-2 regulated apoptosis in cancer. Open Biol 2018;8(5):180002 [DOI:10.1098/rsob.180002] [PMID] []
10. Jeng PS, Inoue-Yamauchi A, Hsieh JJ, Cheng EH. BH3-dependent and independent activation of BAX and BAK in mitochondrial apoptosis. Curr Opin Physiol 2018;3:71-81 [DOI:10.1016/j.cophys.2018.03.005] [PMID] []
11. Lee H-Y, Oh S-H. Autophagy-mediated cytoplasmic accumulation of p53 leads to apoptosis through DRAM-BAX in cadmium-exposed human proximal tubular cells. Biochem Biophys Res Commun 2021;534:128-33 [DOI:10.1016/j.bbrc.2020.12.019] [PMID]
12. Sinha R, Winer AG, Chevinsky M, Jakubowski C, Chen Y-B, Dong Y, et al. Analysis of renal cancer cell lines from two major resources enables genomics-guided cell line selection. Nat Commun 2017;8(1):1-10 [DOI:10.1038/ncomms15165] [PMID] []
13. Karimaei S, Shabestari AN, Mirzaei A, Fatahi B. Apoptosis, cytotoxicity and expression of metastatic suppressor genes increased in human bladder and renal carcinoma cells by Nisin. Transl Res Urol 2022;4(2):83-8 [google scholar]
14. Hosseini SS, Goudarzi H, Ghalavand Z, Hajikhani B, Rafeieiatani Z, Hakemi-Vala M. Anti-proliferative effects of cell wall, cytoplasmic extract of Lactococcus lactis and nisin through down-regulation of cyclin D1 on SW480 colorectal cancer cell line. Iran J Microbiol 2020;12(5):424 [DOI:10.18502/ijm.v12i5.4603]
15. Haghshenas B, Abdullah N, Nami Y, Radiah D, Rosli R, Khosroushahi AY. Different effects of two newly-isolated probiotic Lactobacillus plantarum 15HN and Lactococcus lactis subsp. Lactis 44Lac strains from traditional dairy products on cancer cell lines. Anaerobe 2014;30:51-9 [DOI:10.1016/j.anaerobe.2014.08.009] [PMID]
16. Wu G, Yang Q, Long M, Guo L, Li B, Meng Y, et al. Evaluation of agar dilution and broth microdilution methods to determine the disinfectant susceptibility. J Antibiot 2015;68(11):661-5 [DOI:10.1038/ja.2015.51] [PMID]
17. Van Meerloo J, Kaspers GJ, Cloos J. Cell sensitivity assays: the MTT assay. Cancer cell culture: methods and Protoc 2011:237-45 [DOI:10.1007/978-1-61779-080-5_20] [PMID]
18. Tolosa L, Donato MT, Gómez-Lechón MJ. General cytotoxicity assessment by means of the MTT assay. Protocols in vitro hepatocyte research 2015:333-48 [DOI:10.1007/978-1-4939-2074-7_26] [PMID]
19. Kumar P, Nagarajan A, Uchil PD. Analysis of cell viability by the MTT assay. Cold spring harbor protocols 2018;2018(6):pdb.prot095505 [DOI:10.1101/pdb.prot095505] [PMID]
20. Ghatei N, Nabavi AS, Toosi MHB, Azimian H, Homayoun M, Targhi RG, et al. Evaluation of bax, bcl-2, p21 and p53 genes expression variations on cerebellum of BALB/c mice before and after birth under mobile phone radiation exposure. Iran J Basic Med Sci 2017;20(9):1037 [PMID: 29085599] [PMCID: PMC5651457]
21. ERA Y. Uji Aktivitas. Antiproliferasi Senyawa Ekstrak Lactococcus lactis Terhadap Cell Line. Kanker Paru HTB-179 Secara In Vitro: Universitas Muhammadiyah Yogyakarta; 2022 [google scholar]
22. Shu Y, Yang Y, Zhao Y, Ma L, Fu P, Wei T, et al. Melittin Inducing the Apoptosis of Renal Tubule Epithelial Cells through Upregulation of Bax/Bcl‐2 Expression and Activation of TNF‐α Signaling Pathway. Biomed Res Int 2019;2019(1):9450368 [DOI:10.1155/2019/9450368] [PMID] []
23. Goodarzi M, Fazeli, Sepahi A, Abbas, Eidi, Akram. Investigation of the antiviral properties of Lactobacillus rhamnosus on herpes simplex virus type 2. J Med Sci Stud 2021;32(7):478-89 [DOI:10.52547/umj.32.7.478]
24. Sayadi, Mehran, Tajik. Evaluation of the efficacy of probiotic bacterium Lactobacillus acidophilus in detoxifying aflatoxin B1 based on a simulated model of gastrointestinal secretions. J Med Sci Stud 2018;29(4):270-81 [google scholar]
25. Hajari Taheri F, Mahdavi M, Shokrgozar M, Bayat M, Yazdi M, Abolhassani M. Study of protective effect of lactobacillus acidophilus and lactobacillus casei in reducing the candida albicans infection in BALB/C MICE. J Urmia Univ Med Sci 2013; 23 (7): 784-91. [google scholar]
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
