پیش زمینه و هدف: باکتری ها به طور طبیعی وزیکول هایی در مقیاس نانو که حاوی طیف وسیعی از بیومولکول ها مانند پروتئین ها، DNA و RNA هستند را تولید می کنند. به این ویزکول ها، وزیکول های خارج سلولی (EVs) گفته می شود. این وزیکول ها نقش مهمی در تعامل میزبان و میکروبیوتا دارند. برای جداسازی EVs روش های مختلفی ارائه شده و هر روش دارای مزایا و همچنین محدودیت هایی نیز می باشد. در مطالعه حاضر ما کارآیی دو روش استخراج EVs را مورد بررسی قرار داده ایم.
مواد ورش کار: بیفیدوباکتریوم بیفیدوم در محیط کشت MRS broth در شرایط بیهوازی کشت داده شد. در پروتکل اول از روش اولتراسانتریفیوژ استفاده گردید (روش اولترا) و در روش دوم از اولتراسانتریفیوژ استفاده نشد (روش غیراولترا). بعد از استخراج ویزیکول ها، میزان پروتئین آن ها توسط دستگاه NanoDrop اندازه گیری شد. از روش SDS-PAGE برای مقایسه الگوی پروتئین EVs استفاده شد. تصاویر SEM از نمونه ها گرفته شده و اندازه آن ها توسط نرم افزار Digimizer ارزیابی شد.
یافته ها: نتایج نشان داد که EVs جدا شده با روش اولترا به طور معنی داری میزان پروتئین بالاتری نسبت به روش غیر اولترا(به ترتیب 3/42 و 0/26 mg/ml) داشتند. روش اولترا در مقایسه با روش غیراولترا EVs بیشتر و بزرگتری (حداکثر 235 نانومتر و 117 نانومتر به ترتیب) را جدا کرده بود. همچنین ، الگوی پروتئینی EVs در هر دو روش مشابه بودند.
بحث و نتیجه گیری: نتایج ما نشان داد که روش اولترا سانتریفیوژ روش مناسبتری برای جداسازی EVs بیفیدوباکتریوم بیفیدوم بوده و ویزیکول های بیشتر، با پروتئین بالاتر و اندازه مناسب تر تخلیص می کند. با این حال ، مطالعات بیشتری  برای تأیید نتایج ما مورد نیاز است.