Studies in Medical Sciences
مجله مطالعات علوم پزشکی
Studies in Medical Sciences
Medical Sciences
http://umj.umsu.ac.ir
37
journal37
2717-008X
2717-008X
10.61186/umj
fa
jalali
1401
1
1
gregorian
2022
4
1
33
1
online
1
fulltext
fa
بررسی اثرات ایمنولوژیکی پروتئین نوترکیب FlgE2 در هلیکوباکتر پیلوری بر تغییرات تولید سیتوکین TNF-a در سلولهای ماکروفاژ در محیط آزمایشگاهی
IMMUNOLOGICAL EFFECTS OF FLGE2 RECOMBINANT PROTEIN IN HELICOBACTER PYLORI ON TNF-A CYTOKINE PRODUCTION IN MACROPHAGE CELLS IN VITRO
میکروبیولوژی
میکروبیولوژی
پژوهشي(توصیفی- تحلیلی)
Research
<span style="font-size:8.5pt"><span style="line-height:17pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"><b><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">پیشزمینه و هدف::</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> <i>هلیکوباکتر پیلوری</i> باسیلی گرم منفی است که میتواند در لایههای موکوسی معده انسان کلونیزه شود. این ارگانیسم بر اساس طبقهبندی سازمان بهداشت جهانی در بین فاکتورهای کارسینوژن کلاس 1 قرار دارد. گرچه مطالعات متعددی بر روی واکنش هلیکوباکترپیلوری و سلولهای ایمنی انجام شده است، ولی بررسی واکنش تکتک فاکتورهای بیماریزا با این سلولها میتواند جنبههای مبهم پاتوژنز این باکتری را مشخص کند. بررسی واکنش بین برخی فاکتورهای بیماریزای <i>هلیکوباکتر پیلوری</i> مانند </span></span>CagA<span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> و </span></span>VacA<span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> با سلولهای ایمنی مهم است. از طرفی با بررسی نوع واکنش یک فاکتور که بهعنوان کاندید واکسن نیز مطرح است میتوان نوع رفتار تحریک سلولهای ایمنی را در محیط آزمایشگاه قبل از تزریق آن به حیوان آزمایشگاهی ارزیابی نمود. فاکتور پروتئین نوترکیب </span></span>FlgE2<span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> از هلیکوباکتر پیلوری میتواند بهعنوان یک کاندید مناسب که تاکنون بررسی نشده است مطرح باشد. </span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">هدف از این مطالعه </span></span><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">ارزیابی اثرات ایمنولوژیکی </span></span>FlgE2<span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> بر</span></span> <span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">میزان تولید </span></span>TNF-alpha<span style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> در سلولهای ماکروفاژها در شرایط آزمایشگاهی به روش الایزا میباشد.</span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:8.5pt"><span style="line-height:17pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"><b><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">مواد و روش کار</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">: در این پژوهش تجربی با کد اخلاق زیستی د</span></span> SBU/1542/<span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">، </span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">پروتئین نوترکیب </span></span>FlgE2 <span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">بیان و تخلیص گردید.</span></span> <span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">ماکروفاژهای صفاقی موش استخراج گردید. بهمنظور ارزیابی اثرات پروتئین نوترکیب بر سلولهای ماکروفاژِ از غلظتهای مختلف 4 و 20 و 40 و 80 میکروگرم در میلیلیتر استفاده شد. مایع رویی مواجهه جداسازی شد و بهمنظور ارزیابی اثرات سیتوکینی در تست الایزا استفاده گردید.</span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:8.5pt"><span style="line-height:17pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"><b><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">یافتهها</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">: </span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">بر اساس آنالیز آماری بیشترین میزان ترشح در غلظت </span></span>µg/ml<span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> 20 و پسازآن در غلظت </span></span>µg/ml<span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> 4 </span></span>(P<0.0001) <span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">و سپس </span></span>µg/ml<span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> 40 </span></span>)<span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">0.0017 </span></span>P< ( <span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">مشاهده شد. آنالیز آماری نشان میدهد</span></span> <span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">که نتایج در غلظت </span></span>µg/ml<span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> 4 و 20 و 40 در مقایسه با گروه کنترل دارای اختلاف معنادار و نزدیک به هم میباشد. </span></span><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">بااینحال،</span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> مقدار </span></span>TNF-α<span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> در غلظت ۸۰ </span></span>µg/ml<span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> تفاوت معناداری با گروه کنترل نداشت </span></span><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">(</span></span>P = 0.4028<span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">).</span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:8.5pt"><span style="line-height:17pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"><b><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">بحث و نتیجهگیری</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">: این مطالعه نشان داد که پروتئین نوترکیب </span></span>FlgE2<span style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin"> ازجمله فاکتورهای مهم در بیماریزایی <i>هلیکوباکتر پیلوری</i> میباشد و بررسی ساختار و عملکرد آن برای راهکارهای کاندید واکسن کارآمد بسیار مهم میباشد. </span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">این فاکتور پروتئینی بهخوبی میتواند سیستم ایمنی را تحریک نموده و موجب فعال شدن ماکروفاژها گردد. </span></span><span lang="FA" style="font-size:9.5pt"><span style="font-family:Nazanin">درنتیجه بررسی اثرات این پروتئین بهصورت جداگانه میتواند منجر به راهکارهای درمانی جدید و پیشگیری از عفونتهای <i>هلیکوباکتر پیلوری</i> که نیمی از جمعیت جهان را درگیر خود کرده است، شود.</span></span></span></span></span></span></span><br>
<b><span dir="RTL" lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:107%"><span style="font-family:"Arial",sans-serif"></span></span></span><span style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:107%"><span style="font-family:"Calibri",sans-serif"></span></span></span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:107%"><span style="font-family:"Arial",sans-serif"></span></span></span><span style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:107%"><span style="font-family:"Calibri",sans-serif"></span></span></span></b>
<span style="font-size:11.5pt"><span style="line-height:normal"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"><span style="font-weight:bold"><a name="_Toc416081061"><i><span style="font-size:11.0pt">Background & Aims</span></i></a><span style="font-size:11.0pt">: </span><i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">Helicobacter pylori</span></span></i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> is a gram-negative bacillus that can be colonized in the mucosal layers of the human stomach. According to the classification of the World Health Organization, this organism is among the class 1 carcinogens. Although numerous studies have been performed on the reaction between <i>H</i></span></span><i><span dir="RTL" lang="AR-SA" style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">.</span></span></i><i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> pylori</span></span></i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> and immune cells, however, the study of the reaction of individual pathogens with these cells can reveal obscure aspects of the pathogenesis of this bacterium. It is important to study the reaction between some pathogenic factors of <i>H</i></span></span><i><span dir="RTL" lang="AR-SA" style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">.</span></span></i><i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> pylori</span></span></i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> such as CagA and VacA with immune cells has begun. On the other hand, by examining the type of reaction of a factor that is considered also as a vaccine candidate, we can evaluate the type of immune cell stimulation behavior of the factor <i>in vitro</i> before injection of it into the laboratory animal. FlgE2 recombinant protein from <i>H</i></span></span><i><span dir="RTL" lang="AR-SA" style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">.</span></span></i><i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> pylori</span></span></i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> can be considered as a suitable candidate that has not been studied yet. The aim of this study was to evaluate the immunological effects of FlgE2 on the amount of TNF-alpha production in macrophage cells in laboratory conditions by ELISA method.</span></span><span style="font-size:11.0pt"></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:11.5pt"><span style="line-height:normal"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"><span style="font-weight:bold"><i><span style="font-size:11.0pt">Materials & Methods:</span></i> <span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">In this experimental study with the bioethical code of SBU/1542/D, FlgE2 recombinant protein was expressed and purified.</span></span> <span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">Peritoneal macrophages of mice were extracted. Different concentrations of 4, 20, 40, and 80 μg/ml were used to evaluate the effects of recombinant protein on macrophage cells. Exposure supernatant was isolated and used to evaluate the effects of cytokines on ELISA.</span></span><span style="font-size:11.0pt"></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:11.5pt"><span style="line-height:normal"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"><span style="font-weight:bold"><i><span style="font-size:11.0pt">Results:</span></i> <span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">Based on statistical analysis, the highest secretion was observed at the concentration of 20 µg/ml and then at the concentration of 4 µg/ml (P<0.0001) and 40 µg/ml (P <0.0017). Statistical analysis shows that there was a significant and close difference at 4, 20, and 40 µg/ml, compared to the control group; however, the amount of TNF-α at the concentration of 80 µg/ml was not significantly different from control group (P = 0.4028).</span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:11.5pt"><span style="line-height:normal"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"><span style="font-weight:bold"><i><span style="font-size:11.0pt">Conclusion</span></i><span style="font-size:11.0pt">: </span><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">This study showed that the recombinant FlgE2 protein is one of the important factors in the pathogenicity of <i>H</i></span></span><i><span dir="RTL" lang="AR-SA" style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">.</span></span></i><i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> pylori</span></span></i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> and its structure and function are very important for effective vaccine candidate strategies. This protein factor can stimulate the immune system and activate macrophages. As a result, investigation of the effects of this protein separately can lead to new treatment strategies and prevention of <i>H</i></span></span><i><span dir="RTL" lang="AR-SA" style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal">.</span></span></i><i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> pylori</span></span></i><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-weight:normal"> infections, which has involved half of the world's population.</span></span><i><span style="font-size:11.0pt"></span></i></span></span></span></span>
ماکروفاژ, TNF-a, هلیکوباکتر پیلوری, پروتئین نوترکیب F
Macrophage, TNF-a, H. pylori, Recombinant FlgE2 Protein
45
53
http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-5163-1&slc_lang=fa&sid=1
Frozan
Abidkanjo
فروزان
عابد کانجو
frozanabid69@gmail.com
3700319475328460030834
3700319475328460030834
No
PhD student, Department of Microbiology, School of Biotechnology, Shahid Beheshti School, Tehran, Iran
دانشجوی دکتری، گروه میکروبیولوژیی، دانشکده علوم و فناوری زیستی، دانشکده شهید بهشتی، تهران، ایران
Neda
Soleimani
ندا
سلیمانی
n_soleimani@sbu.ac.ir
3700319475328460030835
3700319475328460030835
Yes
Associate Professor of Medical Bacteriology, Department of Microbiology, School of Biotechnology, Shahid Beheshti School, Tehran, Iran (Corresponding Author)
دانشیار باکتری شناسی پزشکی، گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم و فناوری زیستی، دانشکده شهید بهشتی، تهران، ایران (نویسنده مسئول)
Seyyed Masoud
Hosseini
سید مسعود
حسینی
ma_hosseini@sbu.ac.ir
3700319475328460030836
3700319475328460030836
No
Professor of Virology, Department of Microbiology, School of Biotechnology, Shahid Beheshti School, Tehran, Iran
استاد ویروس شناسی، گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم و فناوری زیستی، دانشکده شهید بهشتی، تهران، ایران
Giuseppe
Zanotti
جوزوپه
زانوتی
3700319475328460030837
3700319475328460030837
No
Professor of Biochemistry, Department of Biomedical Sciences University of Padova, Padova, Italy
استاد بیوشیمی، گروه علوم زیستی پزشکی دانشگاه پادووا، پادووا، ایتالیا