fa ارزیابی بیان ژن‌های Bax و Bcl2 در آستروسیت‌های جداشده از بافت مغز انسان تحت اثر اگزوزوم‌های سرطان خون علوم اعصاب Neuroscience پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) Research <strong><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">پیش‌زمینه و هدف:</span></span></strong> <span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">تهاجم سرطان‌ها ازجمله لوسمی به سیستم عصبی مرکزی اتفاق می‌افتد</span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">، سلول‌های سرطانی ویژگی تکثیر و مقاومت در برابر آپوپتوز دارند.</span></span> <span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">از طرفی اگزوزوم‌ها با ایجاد ارتباطات سلول به سلول موجب پیشرفت سرطان‌ها می‌شوند، </span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">در این مطالعه </span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">اثر </span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">اگزوزوم‌های سرطان خون بر بیان ژن‌های مرتبط با آپوپتوز در آستروسیت‌ها بررسی گردید.</span></span><br> <strong><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">مواد و روش‌ کار</span></span></strong>: <span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">پس از کشت اولیه سلول‌های عصبی استخراج‌شده از بافت مغز، و ارزیابی ایمونوسیتوشیمی</span></span> <span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">توسط آنتی‌بادی‌های </span></span><span dir="LTR">Nestin</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">،</span></span><span dir="LTR"> SOX2</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> و </span></span><span dir="LTR">GFAP</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">، از روش تریپسیناژ جهت جداسازی آستروسیت‌ها استفاده گردید. اگزوزوم‌ها از محیط کشت رده‌ی </span></span><span dir="LTR">Nalm6</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> به روش اولتراسانتریفیوژ استخراج گردید و اثرات آن‌ها بر تکثیر و بیان ژن‌های </span></span><span dir="LTR">Bax</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> و </span></span><a name="_Hlk54335205"><span dir="LTR">Bcl2</span></a><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">‌</span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> <a name="_Hlk54335281">به ترتیب</a> توسط آزمون </span></span><span dir="LTR">DAPI</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> و </span></span><span dir="LTR">Real time PCR</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">‌ در آستروسیت‌ها بررسی گردید.</span></span><br> <strong><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">یافته‌ها: </span></span></strong><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">نتایج ایمونوسیتوشیمی خلوص بالای 90درصد آستروسیت‌ها را نشان داد. آزمون </span></span><span dir="LTR">DAPI</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> پس از گذشت 48 ساعت نشان‌دهنده‌ی افزایش معنادار آستروسیت‌ها تحت تیمار با اگزوزوم <a name="_Hlk54359302">(</a></span></span><span dir="LTR">&micro;g/ml</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">50)</span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> نسبت به گروه کنترل می‌باشد (</span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">001/0</span></span><span dir="LTR"> P<</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">***)</span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">. همچنین میزان بیان ژن‌های </span></span><span dir="LTR">Bax</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> و </span></span><span dir="LTR">Bcl2</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">‌ در آستروسیت‌های تحت تیمار با اگزوزوم به ترتیب نشان‌دهنده‌ی کاهش و افزایش معنادار نسبت به گروه کنترل بوده است (</span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">01/0</span></span><span dir="LTR">P<</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> **</span></span> <span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">و 05/0</span></span><span dir="LTR">P<</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">*)</span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">.</span></span><br> <strong><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">بحث و نتیجه‌گیری</span></span></strong><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">: اگزوزوم‌های سرطان خون موجب بر هم زدن تعادل در تکثیر آستروسیت‌ها و مهار آپوپتوز در آن‌ها با تغییر در بیان ژن‌های </span></span><span dir="LTR">Bax</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> و </span></span><span dir="LTR">Bcl2‌</span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> می‌گردند، بنابراین مطالعات بیشتر جهت شناسایی مسیرهای دقیق مولکولی دخیل در سرطان پیشنهاد می‌شود.</span></span><span style="font-family:Nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"></span></span><span dir="LTR"></span> <a name="_Toc416081061"><strong><em>Background & Aims: </em></strong></a>Unfortunately, today cancers such as leukemia metastasize to the central nervous system (CNS). Cancer cells proliferate and resist apoptosis features. On the other hand, exosomes promote cancer through cell-to-cell communication. This study investigated the effect of leukemia exosomes on the expression of apoptosis-related genes in astrocytes.<br> <strong><em>Materials & Methods: </em></strong>After the primary culture of brain tissue cells, Immunocytochemical evaluation of cells was performed by specific antibodies Nestin, SOX2, and GFAP. Then, astrocytes were purified from other cells by trypsinage. Exosomes were extracted from supernatant of Nalm6 cell line by ultracentrifugation and their effects on proliferation and expression of Bax and Bcl2‌ genes were assessed by DAPI and Real-time PCR‌ in astrocytes, respectively.<br> <strong><em>Results: </em></strong>Results indicated a purity of over 90% of astrocytes in cell culture medium. DAPI test after 48 hours showed a significant increase in astrocytes treated with exosome (50&micro;g/ml) compared to the control group (p < 001). Also, the expression of Bax and Bcl2‌ genes in exosome-treated astrocytes showed a significant decrease and increase compared to the control group (p <0.01 and p <0.05), respectively.<br> <strong><em>Conclusion: </em></strong>Leukemia exosomes disrupt the balance of astrocyte proliferation and inhibit apoptosis in them by altering the expression of Bax and Bcl2 genes. Therefore, further studies are recommended to identify exact molecular pathways of cancer. آستروسیت‌ها, سرطان, اگزوزوم, GFAP, آپوپتوز Astrocytes, cancer, exosome, GFAP, apoptosis 912 920 http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4705-1&slc_lang=fa&sid=1 Parisa Zamani Esmati پریسا زمانی عصمتی p_zamani68@yahoo.com 3700319475328460030381 3700319475328460030381 No Department of Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, Iran گروه زیست شناسی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران Javad Baharara جواد بهارآرا baharara78@gmail.com 3700319475328460030382 3700319475328460030382 Yes Research Center for Animal Development Applied Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, Iran Corresponding Author) مرکز تحقیقات تکوین جانوری بیولوژی کاربردی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران (نویسنده مسئول) Sajad Sahab Negah سجاد سحاب نگاه sahabsajad@yahoo.com 3700319475328460030383 3700319475328460030383 No euroscience Research Center, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran and Shefa Neuroscience Research Center, Khatam Alanbia Hospital, Tehran, Iran مرکز تحقیقات علوم اعصاب، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران Khadijeh Shahrokh abadi خدیجه شاهرخ آبادی shahrokhabady@yahoo.com 3700319475328460030384 3700319475328460030384 No Department of Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, Iran گروه زیست شناسی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران