fa جهش در ناحیه داغ جهش پذیری ژن ERG11 و مقاومت به فلوکونازول در جدایه‌های کلینیکی کاندیدا آلبیکنس در شهر میکروبیولوژی میکروبیولوژی پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) Research <strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">پیش‌زمینه و هدف: </span></span></strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">امروزه مصرف متداول آزول‌ها منجر به افزایش مقاومت به آزول‌ها در میان سویه‌های کاندیدا آلبیکنس شده است. جابجایی‌های آمینواسیدی در آنزیم هدف آزول، </span></span><span dir="LTR">ERG11p</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">، به مقاومت آزولی در بعضی از سویه‌های کلینیکی کاندیدا آلبیکنس نسبت داده می‌شود. هدف از این مطالعه، ارزیابی جهش‌های ژن</span></span> <em><span dir="LTR">ERG11</span></em><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> در جدایه‌های مقاوم به فلوکونازول کاندیدا آلبیکنس در رشت بود.</span></span><br> <strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">مواد و روش کار</span></span></strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">: در این مطالعه، نمونه‌های کلینیکی از مخاط واژینال 50 زن جداسازی شد. جدایه‌های کاندیدا آلبیکنس با استفاده از روش‌های استاندارد تعیین هویت چون </span></span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">تولید </span></span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">لوله زایا و کشت در محیط کروم آگار شناسایی شدند. مقاومت و حساسیت جدایه‌ها به فلوکونازول به کمک روش‌های دیسک دیفیوژن و</span></span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> براث میکرودایلوشن</span></span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> بررسی شد. جهش‌ها در ژن </span></span><em><span dir="LTR">ERG11</span></em><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> در جدایه‌های کلینیکی به روش </span></span><span dir="LTR">PCR</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">- سکوئنسینگ تعیین شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">یافته‌ها</span></span></strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">: در این مطالعه، 20 جدایه کلینیکی کاندیدا آلبیکنس مقاوم به فلوکونازول بودند. بالاترین </span></span><span dir="LTR">MIC</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> ی فلوکونازول </span></span><span dir="LTR">&micro;g/ml</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> 2048 تعیین گردید. همچنین در هشت جدایه مقاوم به فلوکونازول به روش </span></span><span dir="LTR">PCR</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">-توالی یابی، دو جهش بدمعنی (</span></span><span dir="LTR">V437I </span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">و </span></span><span dir="LTR">V488I</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">) در ژن </span></span><em><span dir="LTR">ERG11</span></em>&nbsp;<span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> یافت شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">نتیجه‌گیری</span></span></strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">: به نظر می‌رسد که داشتن هم‌زمان چند جهش در ژن </span></span><span dir="LTR">ERG11</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">، یک علت </span></span><span dir="LTR">MIC</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> ی بالا در جدایه‌های مقاوم کاندیدا آلبیکنس در این مطالعه باشد.</span></span> <span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">بااین‌حال، بررسی دیگر مکانیسم‌های مقاومت به آزول در </span></span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">جدایه‌های </span></span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">کاندیدا آلبیکنس پیشنهاد می‌شود.</span></span> <strong><em>Background & Aims</em></strong>: Nowadays, the common use of azoles has led to increased resistance to azole among Candida albicans strains. Amino acid substitutions <a name="OLE_LINK1">in azole target enzyme</a>, ERG11p, is attributed to azole resistance in some clinical strains of Candida albicans. The aim of this study was to evaluate ERG11 gene mutations in fluconazole-resistant isolates of Candida albicans in Rasht.<br> <strong><em>Materials & Methods</em></strong>: In this study, the clinical specimens were isolated from the vaginal&nbsp;mucosa of 50 women. Candida albicans isolates were identified using standard identification methods such as germ tubes production and culture in CHROMagar media. Resistance and susceptibility of isolates to fluconazole were investigated through disc diffusion and broth micro-dilution methods. The mutations in the ERG11 gene were determined in clinical isolates using PCR-sequencing method.<br> <strong><em>Results</em></strong>: In this study, 20 clinical isolates of Candida albicans were resistant to fluconazole. The highest MIC of fluconazole was determined at 2048 &micro;g/ml. Also, in eight fluconazole-resistant isolates by PCR-sequencing, two missense mutations (V437I and V488I) were found in the ERG11&nbsp;gene.<br> <strong><em>Conclusion</em></strong>: It seems that having several mutations in the ERG11 gene is a reason for high MIC in resistant isolates of Candida albicans in this study. However, investigating other mechanisms of azole resistance is recommended in Candida albicans isolates. کاندیدا آلبیکنس, ERG11, فلوکونازول, MIC, جهش, V488I Candida albicans, ERG11, fluconazole, MIC, mutation, V488I 836 844 http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3984-1&slc_lang=fa&sid=1 Saeedeh Balabandi سعیده بالابندی saeedeh.balabandi@gmail.com 3700319475328460033060 3700319475328460033060 No MSc, Department of Cell and Molecular Biology, Faculty of Biological Sciences, Tonekabon Branch, Islamic Azad University, Tonekabon, Iran کارشناس ارشد، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، واحد تنکابن، دانشگاه آزاد اسلامی، تنکابن، ایران Zeinab Khazaei Koohpar زینب خزائی کوهپر dz.khazaei@gmail.com 3700319475328460033061 3700319475328460033061 Yes Assistant Professor, Department of Cell and Molecular Biology, Faculty of Biological Sciences, Tonekabon Branch, Islamic Azad University, Tonekabon, Iran (Corresponding Author) استادیار، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، واحد تنکابن، دانشگاه آزاد اسلامی، تنکابن، ایران (نویسنده مسئول) Najmeh Ranji نجمه رنجی najmehranji@gmail.com 3700319475328460033062 3700319475328460033062 No Assistant Professor, Department of Biology, Faculty of Sciences, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran استادیار، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران