Studies in Medical Sciences
مجله مطالعات علوم پزشکی
Studies in Medical Sciences
Medical Sciences
http://umj.umsu.ac.ir
37
journal37
2717-008X
2717-008X
10.61186/umj
fa
jalali
1396
12
1
gregorian
2018
3
1
28
12
online
1
fulltext
fa
بررسی اثر Poly(I:C) در مقایسه با LPS در تحریک سلول های مزانشیمال برگرفته از مغز استخوان در ترمیم سوختگی درجه سه پوست موشی
STUDY THE EFFECT OF POLY (I: C) VS LPS ON STIMULATEING BONE MARROW-DERIVED MESENCHYMAL CELLS IN HEALING THIRD-DEGREE SKIN BURNS IN MOUSE
پاتولوژی
پاتولوژی
پژوهشي(توصیفی- تحلیلی)
Research
<strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">پیشزمینه و هدف:</span></span></strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> تأثیر مثبت سلولهای بنیادی مزانشیمی درترمیم آسیبهای بافتی مختلف ازجمله سوختگی گزارش شده است. پتانسیل درمانی این سلولها تحت تأثیر آگونیستهای اختصاصی مربوط به رسپتورهای سطحی آنها با نام (</span></span><span dir="LTR">Toll like receptor) TLR</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">، قابلتغییر به فنوتیپهای پیش التهابی و یا ضدالتهابی میباشد. ازآنجاییکه تغییر فنوتیپ سلولهای مزانشیمال میتواند بر عملکرد درمانی این سلولها مؤثر باشد، لذا این مطالعه بهمنظور بررسی تأثیر </span></span><span dir="LTR">Poly(I:C)</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> (آگونیست </span></span><span dir="LTR">TLR3</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">) در مقایسه با </span></span><span dir="LTR">LPS</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> (آگونیست </span></span><span dir="LTR">TLR4</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">) در تحریک سلولهای مزانشیمی و تغییر پتانسیل درمانی این سلولها در درمان سوختگی درجه سه پوست موش در پژوهشکده زیستفناوری دانشگاه ارومیه انجام گردید.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">مواد و روش کار</span></span></strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">: تعداد 36 موش سوری نر بالغ با محدوده سنی 7- 8 هفته و میانگین وزنی 25-30 گرم انتخاب شدند. سوختگی به روش استاندارد و به کمک تماس یک میلهی فلزی داغ شده در آب جوش در قسمت پشت هر موش به مدت 9 ثانیه ایجاد شد. یک ساعت پس از القاء سوختگی، موشها بهصورت تصادفی در چهار گروه کنترل با دریافت روزانه پماد سیلورسولفادیازین، گروه تحت تیمار با سلولهای مزانشیمی (تیمار یک) با دریافت زیر جلدی یکمیلیون سلول مزانشیمی تحریک نشده، گروه تحت تیمار با سلولهای مزانشیمی تحریکشده با آل پی اس (تیمار دو) با دریافت یکمیلیون سلول مزانشیمی تحریکشده با </span></span><span dir="LTR">LPS</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> و گروه تحت تیمار با سلولهای مزانشیمی تحریکشده با پلی</span></span> <span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">آی</span></span> <span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">سی (تیمار سه) با دریافت یکمیلیون سلول مزانشیمی تحریکشده با </span></span><span dir="LTR">Poly(I:C)</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> تقسیمبندی شدند. نمونهبرداری در روزهای 7، 14 و 21 پس از القاء سوختگی از ناحیهی سوخته به همراه ناحیه سالم اطراف انجام شد و مقاطع بافتی به</span></span> <span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">کمک رنگآمیزی هماتوکسیلین-ائوزین و ماسون تری کروم ازنظر ضخامت بافت جوانهای، سرعت روند بهبود آسیب، نظم و آرایش بافتی در نقطهی التیامی و میزان نشست رشتههای کلاژن در نقطهی آسیب بررسی شدند. نتایج بهدستآمده توسط نرمافزار </span></span><span dir="LTR">SPSS</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> نسخه 18، پس از اجرای آزمون نرمالیته، به روش آنالیز واریانس یکطرفه </span></span><span dir="LTR">one-way ANOVA)</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">) به همراه آزمون تعقیبی توکی و </span></span><span dir="LTR">post hoc</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> تجزیهوتحلیل شدند.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">یافتهها</span></span></strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">: اختلاف ضخامت بافت جوانهای در روز هفت بین گروه کنترل و دو گروه تیمار یک (</span></span><span dir="LTR">P<span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">) و تیمار دو (</span></span><span dir="LTR">P<span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">) ازنظر آماری معنیدار بود. همچنین گروه تیمار دو با ایجاد وسیعترین بافت جوانهای در روز هفت، اختلاف معنیداری با گروه تیمار سه (</span></span><span dir="LTR">P<span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">) نشان داد. کاهش ضخامت بافت جوانهای در هر سه گروه تحت تیمار برخلاف گروه کنترل از روز هفت و با شدت بیشتر در گروه تیمار دو آغاز شد. کمترین ضخامت بافت جوانهای در روز 21 مربوط به تیمار دو بود. نتایج حاصل از رنگآمیزی هماتوکسیلین _ ائوزین و ماسون تری کروم به ترتیب گویای نظم و آرایش بافتی بهتر و رسوب بیشتر رشتههای کلاژن در نقطهی آسیب در گروه تحت تیمار دو بود.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">بحث و نتیجهگیری</span></span></strong><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">: افزایش پتانسیل درمانی سلولهای مزانشیمی تحریکشده با </span></span><span dir="LTR">LPS</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> در مقابل کاهش پتانسیل درمانی سلولهای مزانشیمی تحریکشده با </span></span><span dir="LTR">Poly(I:C)</span><span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;"> میتواند به ترتیب ناشی از کسب فنوتیپ پیش التهابی در مقابل کسب فنوتیپ ضدالتهابی توسط سلولهای مزانشیمی در پاسخ به آگونیستهای مذکور </span></span> <span style="font-family:nazanin;"><span style="font-size:9.5pt;">باشد</span></span></span></span></span>
<a name="_Toc416081061"><strong><em>Background & Aims</em></strong></a>: The positive effect of mesenchymal stem cells in healing of various types of tissue damage such as burn has been reported. The therapeutic potential effects of mesenchymal stem cells influenced by certain agonists from their surface called Toll like receptor (TLR) can be modified into proinflammatory and anti-inflamation phenotypes. It is believed that modification of phenotypes of mesenchymal stem cells can affect their therapeutic function. Therefore, the aim of this study was to assess the influence of Poly(I:C) (TLR3 agonist) versus LPS (TLR4 agonist) in stimulating mesenchymal stem cells and alteration of the therapeutic potential of these cells for the treatment of third-degree skin burns in mice which was performed at institute of Bio-technology, Urmia University, Urmia, Iran.<br>
<strong><em>Materials & Methods</em></strong><strong>: </strong>Total 36 male mice aged 7-8 weeks with 25-30 gr average weights were selected. Based on burn standard method, a stainless-metal rod was heated to 100 in boiling water and burn wounds of 9 second duration were created on each mouse. Within an hour of burn induction, the mice were randomly assigned to four groups, control group with daily application of silver sulfadiazine gel, treatment 1 was treated by receiving subcutaneously 106 unstimulated mesenchymal cells, treatment 2 was treated by receiving subcutaneously 106 lipopolysaccharide (LPS)-stimulated mesenchymal cells, treatment3 was treated by receiving subcutaneously 106 Poly (I:C)-stimulated mesenchymal cells. Biopsies were taken from wounds and some normal tissues around it on days 7, 14 and 21 after burn induction. All samples were examined histopathologically by Hematoxilin-Eosin and masson trichrome stains in terms of thickness of the granulation tissue, tissue repair process, array of granulation tissue and deposition of collagen fibers in the repairing area. Checking normality test was processed using SPSS 18.0 Software (SPSS Inc, Chicago, IL, USA) and data then were analyzed using one-way ANOVA, Tukey and post hoc test.<br>
<strong><em>Results</em></strong>: Thickness of the granulation tissue on day 7 differed significantly between the control group and treatment 1 (P <strong><em>Conclusion</em></strong>: Increased therapeutic potential of LPS -stimulated mesenchymal stem cells versus reduced therapeutic potential of Poly (I:C)-stimulated mesenchymal stem cells can be as a result of attaining the proinflammatory versus anti-inflammatory phenotype in mesenchymal stem cells in response to the respective agonists, respectively.
سوختگی, ترمیم, سلول های بنیادی مزانشیمی تحریک شده, ال پی اس, پلی آی سی
Burn, Healing, Stimulated mesenchymal stem cell, LPS, Poly (I:C)
783
794
http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2867-2&slc_lang=fa&sid=1
Leila
Soleimany
لیلا
سلیمانی
lsoleimany@yahoo.com
3700319475328460025346
3700319475328460025346
Yes
Department of Biology, School of Science, Urmia University, Urmia, Iran
گروه بیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران
Samad
Zare
صمد
زارع
s.zare@urmia.ac.ir
3700319475328460025347
3700319475328460025347
No
Department of Biology, School of Science, Urmia University, Urmia, Iran
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران
Rahim
Hobbenaghi
رحیم
حب نقی
Hobbenaghi @gmail.com
3700319475328460025348
3700319475328460025348
No
Department of Pathobiology, Urmia University, Urmia, Iran
دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران
Nowroz
Delirezh
نوروز
دلیرژ
n.delirezh@urmia.ac.ir
3700319475328460025349
3700319475328460025349
No
Department of Microbiology, School of Veterinary Medicine, Urmia University,
دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران