fa تأثیر لیپوپلی‌ساکارید و پلی‌ریبوسیتدیلیک‌اسیدبه‌عنوان (آگونیست‌هایTLR)، بر میزان تولید نیتریک‌اکسایدو القاء آپوپتوزیس در سلول‌هایTفعال‌شده توسط سلول‌های بنیادی مزانشیمال موش میکروبیولوژی میکروبیولوژی پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) Research <p align="center" dir="rtl"></p> <p align="center" dir="rtl"></p> <p align="center" dir="rtl"></p> <p align="center" dir="rtl"><strong>چکیده</strong></p> <p dir="rtl"><strong>پیش‌زمینه و هدف</strong>:سلول‌های بنیادی مزانشیمال، سلول‌های بالغ پیش‌ساز غیر خون‌ساز و چندتوان معرفیمی‌گردند. سیمایپیش‌التهابییا ضدالتهابی این سلول‌ها در پاسخ‌های ایمنی با فعال شدن گیرنده‌های شبه تول خاص ظاهر می‌گردد. هدف پژوهش حاضر بررسی تأثیر لیپوپلی‌ساکارید و پلی‌ریبوسیتیدیلیک‌اسید در غلظت‌های مختلف و زمان‌های مختلف انکوباسیون بر میزان تولید نیتریک‌اکساید و القاء آپوپتوزیس در سلول‌های<span dir="ltr">T</span>فعال‌شده و ارتباط این دو است.</p> <p dir="rtl"><strong>مواد و روش کار</strong>: از استخوان‌های ران و درشت‌نی به روش فلا<a name="_GoBack"></a>شینگ، سوسپانسیون سلولی تهیه و سلول‌های مزانشیمال به روش چسبندگی پلاستیک جداسازی شدند. پس از بارآمدگی 70 درصدسلول‌ها، سلول‌ها با آگونیست‌های<span dir="ltr">TLR</span>، <span dir="ltr">Poly: IC</span> (یک و پنج میکروگرم بر میلی‌لیتر)، <span dir="ltr">LPS</span> (10 و 20 نانوگرم بر میلی‌لیتر) و غلظت ترکیبی کمینه (<span dir="ltr">Poly: IC</span>یک میکروگرم بر میلی‌لیتر و <span dir="ltr">LPS</span> 10 نانوگرم بر میلی‌لیتر) (<span dir="ltr">LP</span>) در دو زمان مجزاییک و 12 ساعت تیمار شدند. نیتریک‌اکساید مایع روئیسلول‌ها، با روش گریس سنجیده شد. درصد آپوپتوزیس سلول‌های<span dir="ltr">T </span>، با روش فلوسایتومتریرنگ‌آمیزی اکریدین-اورنج/پروپیدیوم-آیداید اندازه‌گیری گردید.</p> <p dir="rtl"><strong>یافته‌ها</strong>: یافته‌ها نشان داد که <span dir="ltr">Poly: IC</span> بیشترین میزان آپوپتوزیس را در غلظت پایین (یک میکروگرم بر میلی‌لیتر و پس از گذشت 12 ساعت) اعمال می‌نماید. درحالی‌که بیشترین میزان آپوپتوزیس سلول‌های<span dir="ltr">T</span> در تیمار با <span dir="ltr">LPS</span> در غلظت بالا (20 نانوگرم بر میلی‌لیتر و یک ساعت) انکوباسیون به دست آمد (<span dir="ltr">P<0.05</span>). همچنین افزایش میزان آپوپتوزیس سلول‌های<span dir="ltr">T</span> در ارتباط با تولید نیتریک‌اکسایدمی‌باشد.</p> <p dir="rtl"><strong>بحث و نتیجه‌گیری</strong>: بر اساس نتایج به‌دست‌آمدهمی‌توان نتیجه گرفت که غلظت آگونیست و زمان تیمار سلول‌های بنیادی با آن می‌تواند اثرات مختلفی در تولید نیتریک‌اکساید و فعالیت آپوپتوزی<span dir="ltr">MSC</span>ها داشته باشد.</p> <p dir="rtl"></p> <p align="center" dir="ltr"></p> <p align="center" dir="ltr"></p> <p dir="ltr"><strong>Abstract</strong></p> <p dir="ltr"><a name="_Toc416081061"><strong><em>Background &&nbsp;Aims</em></strong></a>: Mesenchymal stem cells (MSCs) were introduced as multipotent non-hematopoietic precursor adult cells. Pre or anti-inflammatory features of these cells appear on immune responses by activating specific tool like receptors (TLRs). The aim of this study was to evaluate the effect of Lipopolysaccharide and Polyribocytidylic Acid on different concentration and times of incubation on nitric oxide production and apoptosis induction in activated T-cells.</p> <p dir="ltr"><strong><em>Materials & Methods</em></strong>: Suspension cells were prepared through the femural and tibial bones by flushing method; and Mesenchymal cells were isolated by plastic adhesion technique. When the cultures reached % 70 confluence, cells treated with TLR agonists, Poly: IC (1 and 5 &micro;g/ml), LPS (10 and 20 ng/ml) and the lowest combination concentrations (Poly: IC 1&micro;g/ml and LPS 10ng/ml) (LP) at two different times, 1 and 12hr. Nitric oxide of cell surface liquid were measured by Griess (year) method. Apoptosis percentage in T cells was assayed by flowcytometry in the presence of Achridin orange/propidium iodide (AO/PI).</p> <p dir="ltr"><strong><em>Results</em></strong>: The results showed that Poly: IC could induce the highest T cells apoptosis at low concentration (1 &micro;g/ml) after 12hr incubation. But, LPS could cause T cells apoptosis at high concentration (20 ng/ml) after 1hr incubation (P<0.05). Also, an increase in T cells apoptosis could be related to nitric oxide production.</p> <p dir="ltr"><strong><em>Conclusion</em></strong>: These findings suggest that the concentration of agonist and treatment period of the stem cells could affect nitric oxide production and apoptotic activity in MSCs.</p> <p align="center" dir="ltr"></p> <p align="center" dir="ltr">SOURCE: URMIA MED J 2016: 26(10): 864 ISSN: 1027-3727</p> سلول‌های بنیادی مزانشیمال, آگونیست, TLR, آپوپتوز, لیپوپلی‌ساکارید, Poly: IC, سلول‌هایT. MSCs, agonist, TLR, apoptosis, Poly: IC, LPS, T cells. 852 864 http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1816-2&slc_lang=fa&sid=1 Ramin Mohammadi Mavalo رامین محمدی موالو Immunoramin@yahoo.com 3700319475328460013500 3700319475328460013500 Yes Microbiology Department, Veterinary Faculty, Urmia University, Urmia, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه Ahmad Morshedi احمد مرشدی 3700319475328460013501 3700319475328460013501 No Associate Professor, Microbiology Department, Veterinary Faculty, Urmia University, Urmia, Iran دانشیار، گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه Amir Tukmechi امیر توکمه‌چی 3700319475328460013502 3700319475328460013502 No Assistant Professor, Department of Microbiology, Division of Bacteriology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran استادیار، گروه میکروبیولوژی، بخش باکتری‌شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه Norouz Delirezh نوروز دلیرژ 3700319475328460013503 3700319475328460013503 No Associate Professor, Microbiology Department, Veterinary Faculty, Urmia University, Urmia, Iran دانشیار، گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه