Studies in Medical Sciences

fa تأثیر پروبیوتیک‌های بومی بر بیان ژن‌های ضد سرطانی bax/ bcl2 سلولی سرطانی HT-29 با روش Real Time PCR THE EFFECT OF NATIVE PROBIOTICS ON THE EXPRESSION OF BAX/ BCL2 ANTICANCER GENES IN HT-29 CANCER CELLS BY REAL TIME PCR METHOD میکروبیولوژی میکروبیولوژی پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) Research پیش‌زمینه و هدف: سرطان کولورکتال یکی از شایع‌ترین تومورهای بدخیم در انسان است. پروبیوتیک‌ها بر تعادل باکتری‌های مفید و مضر روده تأثیر می‌گذارد و این تعادل را به نفع افزایش جمعیت باکتری‌های مفید و ایجاد اثرات سلامت بخش تغییر می‌دهند. لذا هدف از مطالعه پیش رو؛ تأثیر پروبیوتیک‌های بومی بر بیان ژن‌های ضد سرطانی bax و bcl2 باید سلولی سرطانی HT-29 با روش Real Time PCR است. مواد و روش‌ها: در این مطالعه پس از کشت سلول‌های سرطانی HT-29 و تیمار آن با عصاره پروبیوتیکی استخراج RNA و سنتز cDNA انجام می‌گردد. آزمون Real-Time PCR با استفاده از پرایمرهای مخصوص ژن‌های ضد سرطانی bax و bcl2 در دستگاه corrbet انجام گردید. همچنین آزمون MTT به‌منظور بررسی توکسیسیته عصاره پروبیوتیک بومی انجام گردید. یافته‌ها: آزمون نشان داد که افزایش غلظت عصاره موردمطالعه باعث کاهش زنده ماندن سلول‌ها به‌صورت وابسته به دوز می‌شوند. مقادیر IC50 برای عصاره پروبیوتیکی ug/ml 300 محاسبه شد. همچنین میزان ژن‌های bax و bcl2 در سلول‌های تحت تیمار با سوپرناتانت عاری از سلول لاکتوکوکوس رامنوسوس برابر 344/1 و 447/1 بود که نشان می‌دهد افزایش بیان این دو ژن است. (میزان بیان ژن bax به مقدار 344/1 برابر و میزان بیان ژن bcl-2 به مقدار 447/1 برابر در گروه تیمار نسبت به گروه کنترل افزایش یافت (p<0.05) ذکر مقدار value-p ضروری است). بحث و نتیجه‌گیری: با توجه به سمیت کم عصاره پروبیوتیک در تست MTT و افزایش بیان ژن‌های bax و bcl2، به نظر می‌رسد می‌توان از پروبیوتیک‌ها به‌عنوان مکمل‌های درمانی در پیشگیری و درمان سرطان‌های گوارشی استفاده کرد. این یافته‌ها نشان می‌دهند که پروبیوتیک‌های بومی می‌توانند به‌عنوان یک راهکار نوین درمانی با تأثیر بالا و عوارض جانبی کم برای درمان و پیشگیری از سرطان کولون مورداستفاده قرار گیرند.   <a name="_Toc416081061">Background &</a> Aims: Colorectal cancer is one of the most common malignant tumors in humans. Probiotics affect the balance of beneficial and harmful bacteria in the intestine, shifting this balance in favor of increasing the population of beneficial bacteria and providing health benefits. Therefore, the aim of the present study is to investigate the effect of indigenous probiotics on the expression of anti-cancer genes Bax and Bcl-2 in HT-29 cancer cells using the real-time PCR method. Materials & Methods: In this study, after culturing HT-29 cancer cells and treating them with probiotic extract, RNA extraction and cDNA synthesis were performed. Real-time PCR was performed using primers specific to the anti-cancer genes Bax and Bcl-2 in a Corbett device. The MTT assay was also performed to investigate the toxicity of the native probiotic extract. Results: The MTT assay showed that increasing the concentration of the studied extract caused a dose-dependent decrease in cell viability. The IC50 value for the probiotic extract was calculated to be 300 µg/mL. Additionally, the expression levels of Bax and Bcl-2 genes in cells treated with Lactococcus rhamnosus cell-free supernatant were 1.344 and 1.447, respectively, indicating an increase in the expression of these two genes. (The expression level of the Bax gene increased by 1.344-fold, and the expression level of the Bcl-2 gene increased by 1.447-fold in the treatment group compared to the control group (p < 0.05). It is necessary to mention the p-value.) Discussion: Considering the low toxicity of the probiotic extract in the MTT assay and the increase in the expression of Bax and Bcl-2 genes, it seems that probiotics can be used as therapeutic supplements in the prevention and treatment of gastrointestinal cancers. These findings indicate that indigenous probiotics can be used as a novel therapeutic strategy with high efficacy and low side effects for the treatment and prevention of colon cancer.   عصاره پروبیوتیک, بیان ژن, سرطان کلون, assay MTT, Real-Time PCR Probiotic extract, gene expression, colon cancer, MTT assay, real-time PCR 746 755 http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1802-8&slc_lang=fa&sid=1 Aida Pourkhorasani آیدا پورخراسانی 3700319475328460036847 3700319475328460036847 No MSc Student, Department of Cellular and Molecular Biology, Sirjan Branch, Islamic Azad University, Sirjan, Iran کارشناسی ارشد، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، واحد سیرجان، دانشگاه آزاد اسلامی، سیرجان، ایران Noushin Khandan Dezfuli نوشین خندان دزفولی nooshinkhandan22@gmail.com 3700319475328460036848 3700319475328460036848 Yes Department of Microbiology, Sirjan Branch, Islamic Azad University, Sirjan, Iran (Corresponding Author) گروه میکروبیولوژی، واحد سیرجان، دانشگاه آزاد اسلامی، سیرجان، ایران (نویسنده مسئول) mahsa forghani مهسا فرقانی mahsafoghani1999@gmail.com 3700319475328460036849 0009-0004-8051-8578 No Doctoral Student in Veterinary Medicine, Department of Veterinary Medicine, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran دانشجوی دکترای حرفه‌ای دامپزشکی، گروه دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران ehsan Stabraghi احسان استبرقی ehsanstabraghi@yahoo.com 3700319475328460036850 3700319475328460036850 No Department of Microbiology, Shahr Babak Branch, Islamic Azad University, Shahre Babak, Iran گروه میکروبیولوژی، واحد شهربابک، دانشگاه آزاد اسلامی، شهربابک، ایران kumarss Amini کیومرث امینی AidaPourkhorasani@gmail.com 3700319475328460036851 3700319475328460036851 No Department of Microbiology, Faculty of Basic Sciences, Saveh Branch, Islamic Azad University, Saveh, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران