Studies in Medical Sciences

fa اثرات سایتوتوکسیک کیتوزان و عصاره‌ی اتانولی زرین گیاه (Dracocephalum kotschyi) بر اشکال تاکی زوئیتی Toxoplasma gondii سویه RH در محیط آزمایشگاهی CYTOTOXIC EFFECT OF CHITOSAN AND ETHANOLIC EXTRACT OF DRACOCEPHALUM KOTSCHYI ON TOXOPLASMA GONDII RH STRAIN IN VITRO انگل و قارچ شناسی انگل و قارچ شناسی پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) Research پیش‌زمینه و هدف: توکسوپلاسموزیس یکی از متداول‌ترین عفونت‌های انگلی انسان و دیگر حیوانات خونگرم به شمار می‌آید. یکی از مشکلات اصلی توکسوپلاسموز، محدودیت درمانی آن است. درمان اصلی این انگل ترکیب سینرژیک پریمتامین و سولفودیازین می‌باشد که دارای عوارض جانبی بالایی هستند بطوریکه پریمتامین به علت تراتوژنیک بودن، در زنان حامله منع مصرف دارد. با توجه به خطرات زیادی که این انگل برای افراد با ایمنی ضعیف و زنان باردار ایجاد می‌کند، بنابراین تولید داروهای ضد توکسوپلاسما با اثربخشی بالا و عوارض جانبی کم از اهداف مهم تحقیقاتی توکسوپلاسماست. هدف از این مطالعه بررسی اثرات سایتوتوکسیک کیتوزان و عصاره‌ی اتانولی زرین گیاه (Dracocephalum kotschyi) بر اشکال تاکی زوئیتی Toxoplasma gondii سویه RH در محیط آزمایشگاهی است. مواد و روش‌ها: تاکی زوئیت سویه RH توکسوپلاسما گوندی با غلظت‌های 45، 90 و 135 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر از عصاره اتانولی زرین گیاه و غلظت‌های 150، 300 و 600 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر کیتوزان و نیز ترکیبات این غلظت‌ها در مقایسه با داروی کنترل مثبت (پریمتامین) و کنترل منفی در مدت‌زمان‌های 24، 48 و 72 ساعت انکوباسیون به‌طور جداگانه مجاورت و سپس با روش رنگ‌آمیزی تریپان بلو و نیز MTT، درصد کشندگی عصاره و کیتوزان با تعیین نسبت تاکی زوئیت‌های مرده در مقایسه با کنترل با انجام سه‌گانه تمامی مراحل بررسی شد. نتایج: به‌طورکلی بعد از گذشت 48 ساعت از انکوباسیون در تست تریپان بلو، غلطت 135 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر زرین گیاه، 600 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر کیتوزان و نیز ترکیب غلظت 90 عصاره با 150 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر کیتوزان در مقایسه با غلظت 500 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر از داروی کنترل با درصد کشندگی به ترتیب: 9/50، 2/77، 3/88 و 2/95 و نیز بررسی نتایج الیزا در تست MTT با OD به ترتیب: 198/0، 087/0، 067/0 و 048/0 نتایج قابل قبولی را از خود نشان دادند. بطوریکه بعد از گذشت 72 ساعت تقریباً در غلظت‌های ذکرشده به‌طور میانگین تاکی زوئیت‌های توکسوپلاسما بیشتر از 80درصد نابود شدند. نتیجه‌گیری: نتایج به‌دست‌آمده نشان داد که، عصاره کیتوزان و به‌ویژه ترکیب آن با عصاره زرین گیاه در مقایسه با داروی کنترل مثبت پریمتامین و نیز کنترل منفی نتایج قابل قبولی را از خود نشان داده و اثرات سیتوتوکسیتی ترکیب این دو دارو به‌طور هم‌زمان بیشتر بود. Background & Aims: Toxoplasmosis is one of the most common parasitic infections in humans and other warm-blooded animals. One of the major problems of toxoplasmosis is its therapeutic limitation. The main treatment for this infection is the synergistic combination of pyrimethamine and sulfadiazine, though pyrimethamine is contraindicated in pregnant women owing to its teratogenicity. Considering many side effects that this parasite poses to immunocompromised individuals and pregnant women, the production of anti-Toxoplasma drugs with high efficacy and low side effects is therefore the main objective of Toxoplasma research. The goal of this study was to evaluate the cytotoxic effects of chitosan and ethanolic extract of Dracocephalum kotschyi on Toxoplasma gondii tachyzoites in RH strains under in vitro condition. Materials & Methods: RH strains of Toxoplasma gondii tachyzoites with the concentrations of 45, 90, and 135 mg / ml of Zarrin-Giah ethanolic extract and concentrations of 150, 300, and 600 mg / ml of chitosan, as well as components of these concentrations were evaluated. They were then compared with the positive control drug (pyrimethamine) and negative control at 24, 48, and 72 hours incubation periods, separately and also by Trypan blue staining and MTT. The lethality percentage of the extract and chitosan was assessed and compared with dead tachyzoites. All stages were evaluated by triple control. Results: Following 48-hour incubation using Trypan blue test, the concentrations of 135 mg / ml of D. kotschyi, 600 mg / ml of chitosan, and 90 extracts with 150 mg / ml of chitosan were examined. Concentrations of 500 mg / ml of control drug with lethality percentage were 50.9, 77.2, 88.3, and 95.2, and ELISA results of MTT test with ODs of 0.098, 0.087 0.064, and 0.048 showed acceptable results. After 72 hours, more than 80% of toxoplasma tachyzoites were destroyed. Conclusion: Our findings revealed that chitosan extract, especially its combination with D. kotschyi extract, showed more promising results relative to the positive control drug, pyrimethamine, and the negative control. Moreover, the cytotoxic effects were maximum when these two drugs were used simultaneously. توکسوپلاسما گوندی, کیتوزان, عصاره زرین گیاه, توکسوپلاسموز, تاکی زوئیت Toxoplasma gondii, Chitosan, Toxoplasmosis, Dracocephalum kotschyi, Tachyzoites 792 801 http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4606-1&slc_lang=fa&sid=1 Sajjad Masoumifard سجاد معصومی فرد smasoumifard@ymail.com 3700319475328460030333 3700319475328460030333 No Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Urmia University of Medical Sciences, Urmia, Iran گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ارومیه، ارومیه، ایران Arash Aminpour آرش امین پور arashaminpouir@gmail.com 3700319475328460030334 3700319475328460030334 Yes Department of Parasitology and Mycology, Faculty of Medicine, Urmia University of Medical Sciences, Urmia, Iran (Corresponding Author) گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ارومیه، ارومیه، ایران (نویسنده مسئول) Soheil Yousefzadeh سهیل یوسف زاده 3700319475328460030335 3700319475328460030335 No Department of Horticulture, Faculty of Agriculture and Natural Resources, Urmia University, Urmia, Iran دانشجوی کارشناسی گروه علوم باغبانی، دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران Mohammad Fattahi محمد فتاحی 3700319475328460030336 3700319475328460030336 No Associated Professor in Horticulture Department, Faculty of Agriculture and Natural Resources, Urmia University, Urmia, Iran دانشیار گروه علوم باغبانی، دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران