fa شناسایی مولکولی گونه‌های فاسیولا در استان آذربایجان غربی آناتومی آناتومی پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) Research <p class="Chekide" style="TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl" dir="rtl"><b><span lang="AR-SA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5pt">پیش‌زمینه و هدف:</span></b><span lang="AR-SA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5pt"> </span><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt">فاسیولیازیس که توسط فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا ایجاد می‌شود، دارای اهمیت بهداشتی و اقتصادی در دنیاست. روش‌های رایج شناسایی عوامل انگلی آن دقیق و قابل‌اعتماد نیستند؛ بنابراین مطالعه حاضر با هدف شناسایی مولکولی گونه‌های فاسیولا در استان آذربایجان غربی طراحی شده است.<p></p></span></p><p class="Chekide" style="TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl" dir="rtl"><b><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt">مواد و روش کار:</span></b><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"> در این مطالعه کرم‌های فاسیولا از کشتارگاه‌های پنج ناحیه استان آذربایجان غربی، شمال غرب ایران جمع‌آوری گردید. گونه‌های انگلی با استفاده از روش‌های مورفولوژیکی و مولکولی، توالی‌های </span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">ITS1</span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span>، </span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"><span dir="ltr"></span><font face="Times New Roman" size="2">5.8s</font></span><span dir="rtl"></span><span style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span> <span lang="FA"><font face="Nazanin" size="2">و </font></span></span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span style="mso-bidi-language: FA" dir="ltr">ITS2</span><span dir="rtl"></span></font></font><span style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span> <span lang="FA"><font face="Nazanin" size="2">ریبوزومال </font></span></span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">DNA</span><span dir="rtl"></span></font></font><span style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span> <span lang="FA"><font face="Nazanin" size="2">شناسایی شد. تعداد 580 کرم بالغ فاسیولا از 90 کبد آلوده (50 کبد گاوی، 40 کبد گوسفندی) جدا شد. از 110 نمونه استخراج </font></span></span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">DNA</span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span> شده، 50 نمونه تعیین توالی گردید.<p></p></span></p><p class="Chekide" style="TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl" dir="rtl"><b><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt">یافته‌ها:</span></b><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"> آنالیز توالی‌ها شباهت 100 درصدی را در نواحی </span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">ITS1 </span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span>(</span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">bp</span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span>428</span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"><span dir="ltr"></span><font face="Times New Roman" size="2">(</font></span><span dir="rtl"></span><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span>، </span><span dir="ltr"></span><span dir="ltr"><span dir="ltr"></span><font face="Times New Roman" size="2">5.8s</font></span><span dir="rtl"></span><span style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span> <span lang="FA"><font face="Nazanin" size="2">(</font></span></span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">bp</span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span>158) و </span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">ITS2</span><span dir="rtl"></span></font></font><span style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span> <span lang="FA"><font face="Nazanin" size="2">(</font></span></span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">bp</span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span>366) همه نمونه‌های تعیین توالی شده نشان داد. شباهت بین فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا با 11 </span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">Mismatch</span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span>، 98درصد بود. بر اساس توالی‌های </span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">ITS1</span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span> و </span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">ITS2</span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span> ریبوزومال </span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">DNA</span><span dir="rtl"></span></font></font><span style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span> <span lang="FA"><font face="Nazanin" size="2">تنها گونه فاسیولا هپاتیکا، در بین گاو و گوسفندهای استان آذربایجان غربی، پخش شده است. درنهایت 150 توالی فاسیولا هپاتیکا (50 توالی از هر ناحیه </font></span></span><font size="2"><font face="Times New Roman"><span dir="ltr">ITS</span><span dir="rtl"></span></font></font><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><span dir="rtl"></span>) از استان آذربایجان غربی در بانک جهانی ژن ثبت گردید.<p></p></span></p><p class="Chekide" style="TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl" dir="rtl"><b><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt">بحث و نتیجه‌گیری:</span></b><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"> بر اساس نتایج این مطالعه شواهدی از وجود فاسیولا ژیگانتیکا در گاو و گوسفندهای استان آذربایجان غربی به دست نیامد و همه نمونه‌های موردبررسی فاسیولا هپاتیکا تشخیص داده شدند. مطالعات بیشتر با مارکرهای مولکولی جدید برای شناسایی دقیق گونه‌ها و درنهایت برای کنترل و پیشگیری از این بیماری انگلی مفید خواهد بود.<p></p></span></p><p class="Chekide" style="TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl" dir="rtl"><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"></span></p><p class="Chekide" style="TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl" dir="rtl"><span lang="FA" style="FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-bidi-language: FA mso-ansi-font-size: 8.5pt"><p> </p></span></p> <p class="Abstract" style="MARGIN: 0in 0in 0pt"><p><strong><font face="Times New Roman" size="3"> </font></strong></p></p><p class="Amatnmagale" style="TEXT-ALIGN: justify MARGIN: 0in 0in 0pt"><font size="3"><font face="Times New Roman"><i><strong>Background & Aims:</strong></i> Fascioliasis caused by <i>Fasciola hepatica</i> and <i>Fasciola gigantica</i> has medical and economic importance in the world. Traditional approaches are not accurate and reliable in identification of agent parasites. Thus the present study was designed to identify the <i>Fasciola spp</i>by molecular methods in West Azerbaijan province.<span lang="AR-SA" dir="rtl"><p></p></span></font></font></p><p class="Amatnmagale" style="TEXT-ALIGN: justify MARGIN: 0in 0in 0pt"><font size="3"><font face="Times New Roman"><b><i>Materials & Methods:</i></b> In current study <i>Fasciola</i> isolates were collected from slaughterhouses in five districts in West Azerbaijan province, Northwestern Iran. Paras</font></font><a name="_GoBack"></a><font face="Times New Roman" size="3">ite species were identified using morphological and molecular tools, ribosomal DNA ITS1, 5.8s and ITS2 sequences.<span style="mso-spacerun: yes">  </span>A number of 580 adult <i>Fasciola </i>worms were isolated from 90 infected livers (50 liver of cattle, 40 liver of sheep). Out of 110 DNA extracted specimens, 50 specimens were subject to direct sequencing.</font></p><p class="Amatnmagale" style="TEXT-ALIGN: justify MARGIN: 0in 0in 0pt"><font size="3"><font face="Times New Roman"><b><i>Results:</i></b> Sequence analysis showed 100% similarity in ITS1 (428 bp), 5.8s (158 bp) and ITS2 (366 bp) regions of all sequences. The degree of identity between <i>F. hepatica</i> and <i>F. gigantica</i> sequences was 98% with 11 nucleotide mismatches. Based on rDNA-ITS1 and ITS2 sequences, only <i>F</i>. <i>hepatica</i> flukes are scattered among cattle and sheep population in West Azerbaijan province. Finally, 150 sequence of <i>F. hepatica </i>(50 sequences of each region of ITS) from West Azerbaijan province were recorded to GenBank. </font></font></p><p class="Amatnmagale" style="TEXT-ALIGN: justify MARGIN: 0in 0in 0pt"><font size="3"><font face="Times New Roman"><b><i>Conclusion:</i></b> The results of this study showed no evidence of <i>F. gigantica</i>in cattle and sheep in West Azerbaijan province. More studies are essential to design new molecular markers will be helpful in correct species identification and therefore, for control and prevention of this parasitic disease.<span style="mso-spacerun: yes">  </span></font></font></p><p class="Amatnmagale" style="TEXT-ALIGN: justify MARGIN: 0in 0in 0pt"><font size="3"><font face="Times New Roman"><span style="mso-bidi-font-family: 'Times New Roman' mso-ascii-font-family: 'Times New Roman' mso-ascii-theme-font: major-bidi mso-hansi-font-family: 'Times New Roman' mso-hansi-theme-font: major-bidi mso-bidi-theme-font: major-bidi"></span></font></font></p><p align="center" class="Amatnmagale" style="TEXT-ALIGN: center LINE-HEIGHT: 12pt MARGIN: 0in 0in 0pt mso-line-height-rule: exactly"><p><font face="Times New Roman" size="3"> </font></p></p><p align="center" class="Amatnmagale" style="TEXT-ALIGN: center MARGIN: 0in 0in 0pt"><font size="3"><font face="Times New Roman">SOURCE: URMIA MED J 2015: 25(11): 1040 ISSN: 1027-3727<span style="mso-bidi-language: FA"><p></p></span></font></font></p> فاسیولا, PCR,ITS1,ITS2, 5.8s و ریبوزومال DNA Fasciola, ITS1, ITS2, 5.8s, PCR, Ribosomal DNA 1033 1040 http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-582-553&slc_lang=fa&sid=1 Hossein Galavani حسین گلوانی 3700319475328460011033 3700319475328460011033 No Faculty of Medicine, Urmia University of Medical Sciences, Urmia گروه انگل شناسی و قارچ شناسی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ارومیه Saber Gholizadeh صابر قلی‌زاده 3700319475328460011034 3700319475328460011034 No Medical Entomology Department, Faculty of Public Health, Urmia University of Medical Sciences گروه حشره شناسی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ارومیه Khosrow Hazrati Tappeh خسرو حضرتی تپه hazrati_tappeh@yahoo.co.nz 3700319475328460011035 3700319475328460011035 Yes , Parasitology and Mycology, Department, Faculty of Medicine, Cellular and Molecular Research Center, Urmia University of Medical Sciences مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی ارومیه