Studies in Medical Sciences

fa مطالعه بیان ژن‌های پمپ MexAB-OprM در ایزوله‌های بالینی سودوموناس ائروجینوزا با روش RT-PCR STUDY THE EXPRESSION OF MEXAB-OPRM PUMP GENES IN CLINICAL ISOLATES OF PSEUDOMONAS AERUGINOSA USING RT-PCR METHOD آناتومی آناتومی پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) Research پیش زمینه و هدف: سودوموناس ائروجینوزا یک باکتری فرصت طلب است که به صورت ذاتی به مواد ضد میکروبی مختلف مقاوم می‌باشد. یکی از علل مقاومت بیان پمپ‌های تخلیه مقاومت به چند دارو نظیر MexAB-OprM می‌باشد. آنالیز بیان ژن‌های کد کننده اجزای پمپ MexAB-OprM نظیر mexA با روش RT-PCR مخصوصاً با یک کیت تجارتی می‌تواند کمک زبادی در انتخاب درمان مناسب آنتی‌بیوتیکی بنماید. بنابراین هدف این تحقیق مطالعه بیان ژن‌های کد کننده اجزای پمپ MexAB-OprM نظیر mexA و oprM با روش RT-PCR در ایزوله‌های بالینی بود.روش بررسی: پس از استخراج RNA از 17 ایزوله بالینی و ساختن cDNA بیان کمی نسبی ژن‌های mexA و oprM با روش RT-PCR به ترتیب با استفاده از کیت تجارتی و بدون آن تعیین شد.یافته‌ها: افزایش بیان هر دو ژن mexA و oprM که به ترتیب با استفاده از کیت و بدون آن تعیین شده بود در هشت ایزوله بالینی مشاهده شد. این افزایش بیان مطابق با افزایش MIC 4-2 برابری برای کربنی سیلین بود. نتیجه گیری: همگرایی میان نتایج حاصل از استفاده و عدم استفاده از کیت یافت شد. بعلاوه همگرایی فقط بین MIC کربنی سیلین از میان آنتی‌بیوتیک‌های استفاده شده در روش فنوتیپی و بیان پمپ MexAB-OprM در تمام ایزوله‌های بالینی یافت شد. بنابراین استفاده از روش فنوتیپی و آنالیز بیان ژن با روش RT-PCR با استفاده از کیت به علت سهولت کار با آن به صورت همزمان توصیه می‌گردد. Background & Aims : Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic bacterium that is intrinsically resistant to different antimicrobial substances. One reason for this resistance is the expression of multiple drug efflux pumps, such as MexAB-OprM. Analysis of expression of the MexAB–OprM pump such as mexA with RT-PCR especially with commercial kit can largely aid in selection of suitable antibiotic treatment. Thus, the aim of this investigation was to study the expression of mexA and oprM genes using RT-PCR in clinical isolates. Materials & Methods : Following the extraction of RNA from 17 clinical isolates and synthesis of cDNA, the relative quantification of mexA and oprM genes were determined by RT- PCR with and without commercial kit, respectively. Results : Over-expression of both mexA and oprM genes were seen in eight clinical isolates. This over-expression corresponded to 2-4 fold increase in MIC for carbenicillin.. Conclusion : The convergence between results obtained from using and not using the kit. Moreover, the convergence between only MIC for carbenicillin among several antibiotics used in phenotypic method and the expression of MexAB-OprM pump was found in all clinical isolates. Therefore, the application of phenotypic method and analysis of gene expression using RT- PCR with commercial kit, due to its ease of working, simultaneously is recommended. SOURCE: URMIA MED J 2014: 25(2): 96 ISSN: 1027-3727 سودوموناس ائروجینوزا, پمپ MexAB-OprM, پمپ‌های چند کاره تخلیه دارو, RT-PCR Pseudomonas aeruginosa, MexAB-OprM, Multidrug efflux pumps, RT-PCR 87 96 http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-582-452&slc_lang=fa&sid=1 Razie Pourahmad راضیه پوراحمد Razieh_Jaktaji@yahoo.com 370031947532846009210 370031947532846009210 Yes Faculty of Science, University of Shahrekord, Saman Road, Shahrekord دانشگاه شهرکرد، Paul M Tulkens پلم تولکنز 370031947532846009211 370031947532846009211 No Cellular and Molecular Pharmacology Unit, UCL, Belgium واحد فارماکولوژی سلولی مولکولی، دانشگاه کاتولیک لوین، Francoise Van Bambeke فرانسواسی ون بمبک 370031947532846009212 370031947532846009212 No Cellular and Molecular Pharmacology Unit, UCL, Belgium واحد فارماکولوژی سلولی مولکولی، دانشگاه کاتولیک لوین،