Studies in Medical Sciences

fa تأثیر پپتید وگلیکان-لیپوپلی ساکارید بر میزان تولید نیتریک اکساید توسط سلول‌های بنیادی مزانشیمال موش(MSC) و القا آپوپتوز در سلول‌های T فعال شده توسط این سلول‌ها EFFECT OF PEPTIDOGLYCAN-LIPOPOLYSACCHARIDE ON NITRIC OXIDE PRODUCTION BY RAT MESENCHYMAL STEM CELL (MSC) AND INDUCTION OF APOPTOSIS IN ACTIVATED T CELL WITH MSC آناتومی آناتومی پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) Research پیش زمینه و هدف: سلول‌های بنیادی مزانشیمال، سلول‌های بالغی هستند که به عنوان سلول‌های پیش ساز غیر خون ساز و چند توانی معرفی می‌شوند. تحریک ویژه گیرنده‌ای شبه تول در سطح سلول‌های بنیادی مزانشیمال می‌توانند پاسخ‌های ایمنی ناشی از این سلول‌ها را به سمت فنوتیپ‌های پیش التهابی یا ضدالتهابی جهت دهی کنند. هدف پژوهش حاضر بررسی تأثیر پپتید وگلیکان-لیپوپلی ساکارید بر روی پلاریزه شدن سلول‌های بنیادی به سمت فنوتیپ ضد التهابی و القا آپوپتوز در سلول‌های T. مواد و روش کار: از استخوان فمور و تیبیا سوسپانسیون سلولی تهیه و به مدت 24ساعت انکوبه شدند. جداسازی سلول‌های بنیادی مزانشیمی با تمایل به چسبیدن به فلاسک صورت گرفت. پس از رسیدن سلول‌ها به تراکم70%، با آگونیست TLR در دو دوز بالا (10نانوگرم/میلی لیتر) و پایین (5نانوگرم/میلی لیتر) و به مدت 1و12 ساعت تیمار شدند. سپس مایع رویی سلول‌ها جهت اندازه گیری نیتریک اکساید جمع‌آوری شد. درصد آپوپتوز در سلول‌های T به روش فلو سایتومتری و رنگ‌آمیزی آکریدین – اورنج / پروپیوم آیداید (AO/PI) اندازه گیری شد.یافته‌ها: MSCها که در دوز پایین(5نانوگرم/میلی لیتر( و 12 ساعت انکوباسیون با آگونیست TLR4تیمار شده بودند افزایش معنی‌داری (p≤0.05) در آپوپتوز القا شده در سلول‌هایT در مقایسه با گروه کنترل نشان دادند. همچنین یافته‌ها افزایش معنی‌داری(p≤0.05) در میزان تولید نیتریک اکساید در دوز بالا (10نانوگرم/میلی لیتر) و 1ساعت انکوباسیونMSC های تیمار شده با آگونیست TLR4نسبت به گروه کنترل نشان دادند.بحث و نتیجه گیری: از پژوهش حاضر می‌توان نتیجه گرفت دوز آگونیست و مدت زمان تیمار سلول‌های بنیادی با آن می‌تواند تأثیرات مختلفی در فعالیت آپوپتوزی MSCها و تولید نیتریک اکساید داشته باشد. Background & Aims : Mesenchymal stem cells (MSCs) are adult cells which are identified as non-hematopoietic and pluripotent stem cells. Specific stimulation of toll like receptors on the surface of mesenchymal stem cells could change immune responses of these cells into the pre or anti-inflammation phenotype. The aim of this study was to evaluate the effect of peptidoglycan-lipopolysaccharide on the polarization of stem cells into the anti inflammation phenotype and apoptosis induction in T cells. Materials & Methods : MSCs were isolated from the femoral and tibial bone marrow and re-suspended in DMEM media, and kept in 5% CO2 incubator at 37 ° C for 24 hours. After that the cell concentration reached to 70 % treated with toll like receptor’s agonist with high (10 ng/ml) and low (5 ng/ml) doses for 1 and 12 hours. Then supernatant of cell culture flask were collected for nitric oxide measurement. Apoptosis percentage in T cells was assayed by flowcytometry in the presence of Acridine orange/ propidium iodide (AO/PI). Result : The percentage of apoptosis in activated T cells significantly (P<0.05) was higher in long term (12 h) and low dose (5 ngr/ml) treatment with TLR4 agonist than the control. Also, the finding indicated that the nitric oxide production significantly (P<0.05) was higher at short term (1 h) and high dose (10 ngr/ml) of TLR agonist in comparison to the control. Conclusion : It should be concluded that the amount of agonist and duration of treatment in stem cells can affect the apoptosis activity and nitric oxide production in MSCs. SOURCE: URMIA MED J 2014: 24(12): 1004 ISSN: 1027-3727 آگونیست TLR، سلول‌های بنیادی مزانشیمال،آپوپتوز، نیتریک اکساید Toll like receptor’s agonist, Mesenchymal stem cell, Apoptosis, Nitric oxide 696 1004 http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-582-437&slc_lang=fa&sid=1 Elham Darabi الهام دارابی elidarabi@ymail.com 370031947532846008856 370031947532846008856 Yes Microbiology Department, Veterinary Faculty, Urmia University, Urmia, Iran بخش میکروب شناسی، دانشکده دامپزشکی،دانشگاه ارومیه Ahmad Morshedi احمد مرشدی 370031947532846008857 370031947532846008857 No Microbiology Department, Veterinary Faculty, Urmia University, Urmia, Iran بخش میکروب شناسی، دانشکده دامپزشکی،دانشگاه ارومیه Norouz Delirezh نوروز دلیرژ 370031947532846008858 370031947532846008858 No Microbiology Department, Veterinary Faculty, Urmia University, Urmia, Iran بخش میکروب شناسی، دانشکده دامپزشکی،دانشگاه ارومیه Amir Tokmechi ، امیر توکمه‌چی 370031947532846008859 370031947532846008859 No Pathobiology & Quality Control Department, Artemia & Aquatic Animal Research Institute, Urmia University ، دانشگاه ارومیه، پژوهشکده آبزیان آرتمیا دانشگاه ارومیه Aram Mokarizade آرام مکاری‌زاده 370031947532846008860 370031947532846008860 No Microbiology Department, Veterinary Faculty, Urmia University, Urmia, Iran بخش میکروب شناسی، دانشکده دامپزشکی،دانشگاه ارومیه