TY - JOUR JF - URMIAMJ JO - Studies in Medical Sciences VL - 25 IS - 6 PY - 2014 Y1 - 2014/8/01 TI - CLONING AND EXPRESSION OF CLOSTRIDIUM BOTULINUM TYPE B BINDING DOMAIN E. COLI TT - همسانه‌سازی و بیان ناحیه اتصالی نوروتوکسین نوع B باکتری کلستریدیوم بوتولینوم در باکتری E. coli N2 - پیش‌زمینه و هدف: سندرم بوتولیسم توسط نوروتوکسین‌های باکتری کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. این نوروتوکسین‌ها دارای هفت سروتیپ از A – G می‌باشند. بهترین راه برای جلوگیری از سندرم بوتولیسم ایجاد شده توسط BONT/B استفاده از واکسن‌های نوترکیب ساخته‌شده‌ی ناحیه اتصالی آن می‌باشد. چون دارای اپی توپ‌های کافی برای تحریک سیستم ایمنی می‌باشد.مواد و روش‌ها: ابتدا سکانس ژن ناحیه اتصالی را از سایت NCBI گرفته شد. سپس پرایمرهای مناسب برای آن طراحی شد. سپس باکتری کشت داده شد و ژنوم آن استخراج شد. از PCR برای تکثیر ژن استفاده گردید. ژن در وکتور pGEM-Teasy وارد شد. بعدوکتور نوترکیب وارد باکتری E. coliDH5α گردید. سپس، زیرهمسانه‌سازی در باکتری E. coliBL21 با استفاده از وکتور بیانی pET28a(+) انجام شد.نتایج: واکنش‌های PCR، تعیین توالی و نتایج حاصل از آن توسط IPTG و بررسی بر روی SDS – PAGE و تائید به روش وسترن نشان‌دهنده صحت کلونینگ و بیان بود.نتیجه‌گیری: کلون و بیان این کاندید واکسن با موفقیت انجام شد و پتانسیل ایمنی‌زایی باید بررسی شود.  SP - 502 EP - 510 AU - Rezaeiani, Siamak AU - Ebrahimi, Firoz AU - Honari, Hossein AU - Hajizade, Abbas AU - Barati, Babak AD - Department of Biology, Imam Hossein University KW - Clostridium botulinum KW - BONT/B KW - Cloning KW - Expression KW - Vaccine UR - http://umj.umsu.ac.ir/article-1-2366-fa.html ER -