fa مقایسه لام های تماسی و برشهای بافتی با استفاده از روشهای رنگ آمیزی مختلف در تشخیص عفونت پنوموسیستیس کارینی انگل و قارچ شناسی انگل و قارچ شناسی پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) Research <p></p> <p dir="RTL"><strong>پیش‌زمینه و هدف: </strong>پنوموسیستیس‌ کارینی‌ یک میکروارگانیسم خارج سلولی و موجودی‌ فرصت‌طلب‌ است‌ که‌ در شرایط‌ طبیعی‌، بدن‌ مانع‌ تهاجم‌ آن‌ می‌گردد ولی‌ در شرایط‌ ضعف‌ یا نارسایی‌ ایمنی‌ مثلاً در جریان‌ بیماری‌ ایدز، هوچکین و سایر بیماری‌های‌ تضعیف‌ کننده‌ دستگاه‌ ایمنی‌ به‌ بدن‌ تهاجم‌ کرده‌ و عفونت ایجاد می‌کند. هدف این مطالعه مقایسه لام‌های تماسی و برشهای بافتی با استفاده از روش‌های رنگ‌آمیزی متانامین سیلور، گیمسا، گرام وایگرت، پاپا نیکولائو و هماتوکسیلین ائوزین ازنظر زمان رنگ‌آمیزی، سهولت، هزینه، قابلیت دسترسی به مواد و روش‌ها، شناسایی اشکال مختلف میکروارگانیسم پنوموسیستیس کارینی و ویژگی و توانایی این روش‌ها در تشخیص پنوموسیستیس کارینی می‌باشد.</p> <p dir="RTL"><strong>مواد و روش کار: </strong>برای ایجاد پنوموسیستوزیس در رت‌های نژاد ویستار به مدت 12-10 هفته و هر هفته 2 بار به میزان 5/0 سی‌سی دگزامتازون زیر جلدی تزریق شد که بعد از ایجاد بیماری از ریه رت‌ها لام‌های گسترش تماسی و همچنین قطعه‌هایی در فرمالین درصد10 جهت لام‌های برش بافتی استفاده شد سپس لام‌های موجود با روش‌های رنگ‌آمیزی متان امین سیلور، گرام وایگرت، پاپانیکولائو، گیمسا، هماتوکسیلین ائوزین رنگ‌آمیزی شده و ازلحاظ زمان رنگ‌آمیزی، سهولت، هزینه و قابلیت دسترسی آن‌ها به یکدیگر مقایسه شدند. همچنین ازنظر ویژگی و توانایی روش‌های تشخیص میکروارگانیسم در برش‌های بافتی و گسترش‌های تماسی نیز با همدیگر مقایسه شدند.</p> <p dir="RTL"><strong>یافته‌ها: </strong>روش‌های رنگ‌آمیزی گیمسا و پاپانیکولائو قادر به رنگ‌آمیزی اجسام داخل کیست می‌باشند و دیواره کیست را رنگ نمی‌کنند. روش‌های رنگ‌آمیزی متانامین سیلور و گرام وایگرت دیواره‌ی کیست‌ها را رنگ‌آمیزی می‌کنند. گیمسا راحت‌ترین، کم‌هزینه‌ترین و سریع‌ترین روش جهت تشخیص میکروارگانیسم می‌باشد و در مقابل متانامین سیلور، پرهزینه‌ترین و زمان‌برترین روش جهت تشخیص می‌باشد. همچنین روش رنگ‌آمیزی متانامین سیلور، گرام وایگرت، پاپانیکولائو قادر به رنگ‌آمیزی و تشخیص پنوموسیستیس کارینی در برش‌های بافتی و گسترش‌های تماسی می‌باشند ولی گیمسا فقط قادر به تشخیص میکروارگانیسم در گسترش‌های تماسی بوده و هماتوکسیلین ائوزین قادر به تشخیص میکروارگانیسم در هیچ‌کدام از نمونه‌ها نمی‌باشد.</p> <p dir="RTL"><strong>بحث و نتیجه‌گیری: </strong>در میان رنگ‌آمیزی‌های انجام‌شده، رنگ‌آمیزی پاپانیکولائو و گیمسا به علت این‌که اجسام داخل کیست را به‌صورت واضح رنگ کرده و همچنین تعداد کمی و یا هیچ‌کدام از مخمرها با این روش‌ها رنگ نمی‌گیرند، نسبت به رنگ‌آمیزی گرام وایگرت که دیواره کیست میکروارگانیسم را رنگ کرده و مخمرها نیز با این روش رنگ می‌گیرند ویژگی بالاتری جهت تشخیص پنوموسیستیس کارینی دارند. متانامین سیلور در تشخیص پنوموسیستیس کارینی در نمونه‌های برونکوآلوئلار لاواژ، خلط و بیوپسی استاندارد طلایی می‌باشد، ولی در نمونه‌های رنگ‌آمیزی شده معمولاً اندازه کیست‌های پنوموسیستیس کارینی تقریباً هم‌اندازه مخمرها می‌باشد و همچنین مخمرها مانند کیست‌های پنوموسیستیس کارینی رنگ می‌گیرند احتمال مثبت کاذب در تشخیص نمونه‌ها وجود دارد، درنتیجه توصیه می‌شود جهت تشخیص دقیق‌تر میکروارگانیسم در نمونه‌های به‌دست‌آمده همراه با رنگ‌آمیزی متانامین سیلور حتماً از رنگ‌آمیزی گیمسا که به‌جای دیواره کیست‌ها اجسام داخل کیست را رنگ می‌کند نیز استفاده شود.</p> <p dir="RTL"></p> <p></p> <p dir="LTR"><strong><em>Background & Aims</em></strong>: Pneumocystis carinii is an opportunist extracellular microorganism. The body can defend itself against it in natural conditions. But it can cause an infection in immunodificient conditions such as HIV, Hodgkins and other immunosuppressed diseases. The aim of this study was to apply a comparison of different staining methods such as Methenamine silver, Giemsa, Gram - Weigert, Papanicolaou and Hematoxylin eosin stains in terms of staining times, easiness, cost and availability of material and methods, detection of P. carinii, different forms and capability of this methods in detection of P. carinii in impression slides, and tissue slices of rats lungs.</p> <p dir="LTR"><strong><em>Materials & Methods</em></strong>: In order to induce of Pneumocystis pneumonia, the Sprague Dawley rats were injected 0.5cc of dexamethasone subcutaneously twice a week over a 10-12 weeks, after induce pneumonia we removed the lungs and made impression slides and&nbsp; pieces of lung was put&nbsp; in 10% formalin to make tissue slides. After that the slides stained by Methenamine silver, Gram Weigert, papanicolaou, Giemsa and Hematoxylin eosin, and compared them in terms of staining time, easiness, cost and availability. In addition, we compared the capability of different methods to detect the microorganism in tissue preparation slices and impression slides.</p> <p dir="LTR"><strong><em>Results</em></strong>: Giemsa and papanicolaou are capable to stain the intra cyst bodies but can&rsquo;t stain the cysts wall. Methenamine silver and Gram Weigert stain the cysts wall.&nbsp; Giemsa is fastest, cheapest and the most easy method to stain, vs. methenamine silver is expensive, difficult and takes long time to do. Methenamine silver papanicolaou, Gram Weigert can detect P. carinii in both tissue slice and smears but Hematoxylin eosin can&rsquo;t detect either slices or impression slides. Giemsa only detects microorganism in impression slides.</p> <p dir="LTR"><strong><em>Conclusions</em></strong>: In these staining methods, Papanicolaou&nbsp; and Giemsa have more specificity than Gram Weigert to detect the P. carinii&nbsp; in specimens, because these staining method don&rsquo;t specify the wall of cysts together with yeasts, because of this the wrong diagnosis with Giemsa and Papanicolaou is less than Gram Weigert. Methenamine silver is golden standard method to detect P. carinii but it stains the yeasts like P. carinii because the yeasts are similar to cysts in shape and color when we stain with methenamine silver. Because of this we conclude that Methenamine silver is suitable and useful for demonstration of P. carinii cysts but it is better to be used together with Giemsa, because Giemsa can stain the intra cyst bodies so the diagnosis of pneumocystis pneumonia becomes easy with these methods together.</p> <p dir="LTR"></p> <p align="center" dir="LTR">SOURCE: URMIA MED J 2016: 27(6): 457 ISSN: 1027-3727</p> کلید واژه ها: پنوموسیستیس کارینی, رت, نمونه های تشخیصی, روشهای رنگ آمیزی Pneumocystis carinii, Rat, Diagnostic specimens, Different staining methods 449 457 http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-39-1&slc_lang=fa&sid=1 Khosrow Hazrati Tappeh1 خسرو حضرتی تپه hazrati_tappeh@yahoo.co.nz 3700319475328460015652 3700319475328460015652 Yes Urmia University of Medical Sciences,Iran دانشگاه علوم پزشکی ارومیه ،ایران Toohid Yahyapour توحید یحیی پور shabnammedico@yahoo.com 3700319475328460015653 3700319475328460015653 No Urmia University of Medical Sciences ,Iran دانشگاه علوم پزشکی ارومیه ایران Jalil Musavi جلیل موسوی musavi_sjalil@umsu.ac.ir 3700319475328460015654 3700319475328460015654 No Urmia University of Medical Sciences,Iran دانشگاه علوم پزشکی ارومیه ایران Habib Mohammadzadeh حبیب محمد زاده habibmhaji@yahoo.com 3700319475328460015655 3700319475328460015655 No Urmia University of Medical Sciences,Iran دانشگاه علوم پزشکی ارومیه ایران Kambiz Diba کامبیز دیبا kambizdiba@yahoo.com 3700319475328460015656 3700319475328460015656 No Urmia University of Medical Sciences,Iran دانشگاه علوم پزشکی ارومیه Ali Rahiminejad 5* علی رحیمی نژاد Rahiminejad2855@yahoo.com 3700319475328460015657 3700319475328460015657 No Urmia University of Medical Sciences,Iran دانشگاه علوم پزشکی ارومیه ایران